આ લેખ તમને શીખવે છે કે લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમ કેવી રીતે પસંદ કરવી

લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી એ દરેક ઘટકની સામગ્રી અને કાચી સામગ્રી, મધ્યવર્તી તૈયારીઓ અને પેકેજિંગ સામગ્રીમાં અશુદ્ધિઓના પરીક્ષણ માટેની મુખ્ય પદ્ધતિ છે, પરંતુ ઘણા પદાર્થો પર આધાર રાખવા માટે પ્રમાણભૂત પદ્ધતિઓ નથી, તેથી નવી પદ્ધતિઓ વિકસાવવી અનિવાર્ય છે. પ્રવાહી તબક્કાની પદ્ધતિઓના વિકાસમાં, ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ એ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફીનો મુખ્ય ભાગ છે, તેથી યોગ્ય ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ કેવી રીતે પસંદ કરવી તે નિર્ણાયક છે. આ લેખમાં, લેખક ત્રણ પાસાઓમાંથી પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમ કેવી રીતે પસંદ કરવી તે સમજાવશે: એકંદર વિચારો, વિચારણા અને એપ્લિકેશનનો અવકાશ.

A. લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમ પસંદ કરવા માટેના એકંદર વિચારો

1. વિશ્લેષકના ભૌતિક અને રાસાયણિક ગુણધર્મોનું મૂલ્યાંકન કરો: જેમ કે રાસાયણિક માળખું, દ્રાવ્યતા, સ્થિરતા (જેમ કે ઓક્સિડાઇઝ્ડ/ઘટાડવું/હાઇડ્રોલાઇઝ્ડ થવું સરળ છે કે કેમ), એસિડિટી અને ક્ષારતા, વગેરે, ખાસ કરીને રાસાયણિક માળખું મુખ્ય છે. ગુણધર્મો નક્કી કરવા માટેનું પરિબળ, જેમ કે સંયુક્ત જૂથમાં મજબૂત અલ્ટ્રાવાયોલેટ શોષણ અને મજબૂત ફ્લોરોસેન્સ છે;

2. વિશ્લેષણનો હેતુ નક્કી કરો: શું ઉચ્ચ વિભાજન, ઉચ્ચ કૉલમ કાર્યક્ષમતા, ટૂંકા વિશ્લેષણ સમય, ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા, ઉચ્ચ દબાણ પ્રતિકાર, લાંબી કૉલમ જીવન, ઓછી કિંમત, વગેરે જરૂરી છે;

1. યોગ્ય ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ પસંદ કરો: ક્રોમેટોગ્રાફિક ફિલરની રચના, ભૌતિક અને રાસાયણિક ગુણધર્મોને સમજો, જેમ કે કણોનું કદ, છિદ્રનું કદ, તાપમાન સહનશીલતા, pH સહિષ્ણુતા, વિશ્લેષકનું શોષણ વગેરે.

1. લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમ પસંદ કરવા માટેની વિચારણાઓ

આ પ્રકરણ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમના ભૌતિક અને રાસાયણિક ગુણધર્મોના પરિપ્રેક્ષ્યમાંથી ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમ પસંદ કરતી વખતે ધ્યાનમાં લેવાના પરિબળોની ચર્ચા કરશે. 2.1 ફિલર મેટ્રિક્સ

2.1.1 સિલિકા જેલ મેટ્રિક્સ મોટાભાગના લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કોલમનું ફિલર મેટ્રિક્સ સિલિકા જેલ છે. આ પ્રકારના ફિલરમાં ઉચ્ચ શુદ્ધતા, ઓછી કિંમત, ઉચ્ચ યાંત્રિક શક્તિ હોય છે અને તે જૂથોમાં ફેરફાર કરવા માટે સરળ હોય છે (જેમ કે ફિનાઇલ બોન્ડિંગ, એમિનો બોન્ડિંગ, સાયનો બોન્ડિંગ, વગેરે), પરંતુ તે સહન કરે છે તે pH મૂલ્ય અને તાપમાન શ્રેણી મર્યાદિત છે: મોટાભાગના સિલિકા જેલ મેટ્રિક્સ ફિલર્સની pH શ્રેણી 2 થી 8 છે, પરંતુ ખાસ સંશોધિત સિલિકા જેલ બોન્ડેડ તબક્કાઓની pH શ્રેણી 1.5 થી 10 જેટલી પહોળી હોઈ શકે છે, અને ત્યાં ખાસ સંશોધિત સિલિકા જેલ બોન્ડેડ તબક્કાઓ પણ છે જે નીચા pH પર સ્થિર છે, જેમ કે Agilent ZORBAX RRHD સ્ટેબલબોન્ડ-C18, જે pH 1 થી 8 પર સ્થિર છે; સિલિકા જેલ મેટ્રિક્સની ઉપરની તાપમાન મર્યાદા સામાન્ય રીતે 60 ℃ હોય છે, અને કેટલાક ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમ ઉચ્ચ pH પર 40 ℃ તાપમાન સહન કરી શકે છે.

2.1.2 પોલિમર મેટ્રિક્સ પોલિમર ફિલર્સ મોટે ભાગે પોલિસ્ટરીન-ડિવિનાઇલબેન્ઝીન અથવા પોલિમેથાક્રીલેટ હોય છે. તેમના ફાયદા એ છે કે તેઓ વિશાળ પીએચ શ્રેણીને સહન કરી શકે છે - તેનો ઉપયોગ 1 થી 14 ની રેન્જમાં થઈ શકે છે, અને તેઓ ઊંચા તાપમાને વધુ પ્રતિરોધક છે (80 °C થી ઉપર પહોંચી શકે છે). સિલિકા-આધારિત C18 ફિલરની તુલનામાં, આ પ્રકારના ફિલરમાં મજબૂત હાઇડ્રોફોબિસિટી હોય છે, અને મેક્રોપોરસ પોલિમર પ્રોટીન જેવા નમૂનાઓને અલગ કરવામાં ખૂબ અસરકારક છે. તેના ગેરફાયદા એ છે કે સ્તંભની કાર્યક્ષમતા ઓછી છે અને યાંત્રિક શક્તિ સિલિકા-આધારિત ફિલર્સ કરતા નબળી છે. 2.2 કણ આકાર

મોટાભાગના આધુનિક HPLC ફિલર્સ ગોળાકાર કણો છે, પરંતુ કેટલીકવાર તે અનિયમિત કણો હોય છે. ગોળાકાર કણો નીચલા કૉલમ દબાણ, ઉચ્ચ કૉલમ કાર્યક્ષમતા, સ્થિરતા અને લાંબું જીવન પ્રદાન કરી શકે છે; જ્યારે ઉચ્ચ સ્નિગ્ધતાવાળા મોબાઇલ તબક્કાઓ (જેમ કે ફોસ્ફોરિક એસિડ) નો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે અથવા જ્યારે નમૂનાનું દ્રાવણ ચીકણું હોય છે, ત્યારે અનિયમિત કણોમાં ચોક્કસ સપાટીનો વિસ્તાર મોટો હોય છે, જે બે તબક્કાઓની સંપૂર્ણ ક્રિયા માટે વધુ અનુકૂળ હોય છે, અને કિંમત પ્રમાણમાં ઓછી હોય છે. 2.3 કણોનું કદ

કણોનું કદ જેટલું નાનું છે, કૉલમની કાર્યક્ષમતા જેટલી વધારે છે અને વિભાજન વધારે છે, પરંતુ ઉચ્ચ દબાણ પ્રતિકાર વધુ ખરાબ છે. સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાતી કૉલમ 5 μm કણ કદની કૉલમ છે; જો વિભાજનની આવશ્યકતા વધુ હોય, તો 1.5-3 μm ફિલર પસંદ કરી શકાય છે, જે કેટલાક જટિલ મેટ્રિક્સ અને બહુ-ઘટક નમૂનાઓની વિભાજન સમસ્યાને ઉકેલવા માટે અનુકૂળ છે. UPLC 1.5 μm ફિલરનો ઉપયોગ કરી શકે છે; 10 μm અથવા મોટા કણોના કદના ફિલરનો ઉપયોગ ઘણીવાર અર્ધ-પ્રારંભિક અથવા પ્રારંભિક કૉલમ માટે થાય છે. 2.4 કાર્બન સામગ્રી

કાર્બન સામગ્રી સિલિકા જેલની સપાટી પર બંધાયેલા તબક્કાના પ્રમાણને દર્શાવે છે, જે ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર અને બોન્ડેડ તબક્કાના કવરેજ સાથે સંબંધિત છે. ઉચ્ચ કાર્બન સામગ્રી ઉચ્ચ સ્તંભની ક્ષમતા અને ઉચ્ચ રીઝોલ્યુશન પ્રદાન કરે છે, અને તેનો ઉપયોગ ઘણીવાર જટિલ નમૂનાઓ માટે થાય છે જેમાં ઉચ્ચ વિભાજનની જરૂર હોય છે, પરંતુ બે તબક્કાઓ વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાના લાંબા સમયને કારણે, વિશ્લેષણનો સમય લાંબો છે; ઓછી કાર્બન સામગ્રીવાળા ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમમાં વિશ્લેષણનો સમય ઓછો હોય છે અને તે વિવિધ પસંદગીઓ બતાવી શકે છે, અને તેનો ઉપયોગ ઘણીવાર સરળ નમૂનાઓ માટે થાય છે જેને ઝડપી વિશ્લેષણની જરૂર હોય છે અને નમૂનાઓ કે જેને ઉચ્ચ જલીય તબક્કાની સ્થિતિની જરૂર હોય છે. સામાન્ય રીતે, C18 ની કાર્બન સામગ્રી 7% થી 19% સુધીની હોય છે. 2.5 છિદ્ર કદ અને ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર

HPLC શોષણ માધ્યમ છિદ્રાળુ કણો છે અને મોટાભાગની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા છિદ્રોમાં થાય છે. તેથી, શોષવા અને અલગ કરવા માટે પરમાણુઓએ છિદ્રોમાં પ્રવેશ કરવો આવશ્યક છે.

છિદ્રનું કદ અને ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર એ બે પૂરક ખ્યાલો છે. નાના છિદ્રના કદનો અર્થ થાય છે વિશાળ ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર, અને ઊલટું. વિશાળ ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર નમૂનાના અણુઓ અને બંધાયેલા તબક્કાઓ વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયામાં વધારો કરી શકે છે, રીટેન્શન વધારી શકે છે, નમૂના લોડિંગ અને કૉલમની ક્ષમતામાં વધારો કરી શકે છે અને જટિલ ઘટકોને અલગ કરી શકે છે. સંપૂર્ણપણે છિદ્રાળુ ફિલર્સ આ પ્રકારના ફિલરથી સંબંધિત છે. ઉચ્ચ વિભાજન આવશ્યકતાઓ ધરાવતા લોકો માટે, મોટા ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર સાથે ફિલર પસંદ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે; નાના ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર પાછળનું દબાણ ઘટાડી શકે છે, કૉલમની કાર્યક્ષમતામાં સુધારો કરી શકે છે અને સંતુલન સમય ઘટાડી શકે છે, જે ગ્રેડિયન્ટ વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે. કોર-શેલ ફિલર્સ આ પ્રકારના ફિલરથી સંબંધિત છે. વિભાજનને સુનિશ્ચિત કરવાના આધાર પર, ઉચ્ચ વિશ્લેષણ કાર્યક્ષમતાની જરૂરિયાતો ધરાવતા લોકો માટે નાના ચોક્કસ સપાટી વિસ્તાર સાથે ફિલર પસંદ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવે છે. 2.6 છિદ્ર વોલ્યુમ અને યાંત્રિક શક્તિ

છિદ્ર વોલ્યુમ, જેને "પોર વોલ્યુમ" તરીકે પણ ઓળખવામાં આવે છે, તે એકમ કણ દીઠ રદબાતલ વોલ્યુમના કદનો સંદર્ભ આપે છે. તે ફિલરની યાંત્રિક શક્તિને સારી રીતે પ્રતિબિંબિત કરી શકે છે. મોટા છિદ્રના જથ્થાવાળા ફિલર્સની યાંત્રિક શક્તિ નાના છિદ્રોના જથ્થા સાથે ફિલર કરતા થોડી નબળી હોય છે. 1.5 mL/g કરતા ઓછા અથવા તેના બરાબર છિદ્રના જથ્થા સાથેના ફિલરનો ઉપયોગ મોટાભાગે HPLC અલગ કરવા માટે થાય છે, જ્યારે 1.5 mL/g કરતાં વધુ છિદ્રના જથ્થા સાથે ફિલરનો ઉપયોગ મુખ્યત્વે મોલેક્યુલર એક્સક્લુઝન ક્રોમેટોગ્રાફી અને લો-પ્રેશર ક્રોમેટોગ્રાફી માટે થાય છે. 2.7 કેપિંગ દર

કેપિંગ સંયોજનો અને ખુલ્લા સિલાનોલ જૂથો (જેમ કે આલ્કલાઇન સંયોજનો અને સિલનોલ જૂથો વચ્ચે આયનીય બંધન, વાન ડેર વાલ્સ દળો અને એસિડિક સંયોજનો અને સિલનોલ જૂથો વચ્ચેના હાઇડ્રોજન બોન્ડ્સ) વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાને કારણે થતા ટેઇલિંગ શિખરોને ઘટાડી શકે છે, જેનાથી સ્તંભની કાર્યક્ષમતા અને ટોચના આકારમાં સુધારો થાય છે. . અનકેપ્ડ બોન્ડેડ તબક્કાઓ, ખાસ કરીને ધ્રુવીય નમૂનાઓ માટે, કેપ્ડ બોન્ડેડ તબક્કાઓની તુલનામાં વિવિધ પસંદગીઓ ઉત્પન્ન કરશે.

1. વિવિધ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમનો એપ્લિકેશન અવકાશ

આ પ્રકરણ કેટલાક કિસ્સાઓ દ્વારા વિવિધ પ્રકારના લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમના એપ્લિકેશન સ્કોપનું વર્ણન કરશે.

3.1 રિવર્સ્ડ-ફેઝ C18 ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ

C18 કૉલમ સૌથી સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતી રિવર્સ્ડ-ફેઝ કૉલમ છે, જે મોટાભાગના કાર્બનિક પદાર્થોની સામગ્રી અને અશુદ્ધતા પરીક્ષણોને પૂર્ણ કરી શકે છે, અને તે મધ્યમ-ધ્રુવીય, નબળા ધ્રુવીય અને બિન-ધ્રુવીય પદાર્થોને લાગુ પડે છે. C18 ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમનો પ્રકાર અને સ્પષ્ટીકરણ ચોક્કસ વિભાજન જરૂરિયાતો અનુસાર પસંદ કરવો જોઈએ. ઉદાહરણ તરીકે, ઉચ્ચ વિભાજન આવશ્યકતાઓ ધરાવતા પદાર્થો માટે, 5 μm*4.6 mm*250 mm સ્પષ્ટીકરણોનો વારંવાર ઉપયોગ થાય છે; જટિલ વિભાજન મેટ્રિસિસ અને સમાન ધ્રુવીયતા ધરાવતા પદાર્થો માટે, 4 μm*4.6 mm*250 mm સ્પષ્ટીકરણો અથવા નાના કણોના કદનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, લેખકે celecoxib API માં બે જીનોટોક્સિક અશુદ્ધિઓ શોધવા માટે 3 μm*4.6 mm*250 mm કૉલમનો ઉપયોગ કર્યો છે. બે પદાર્થોનું વિભાજન 2.9 સુધી પહોંચી શકે છે, જે ઉત્તમ છે. વધુમાં, વિભાજન સુનિશ્ચિત કરવાના આધાર હેઠળ, જો ઝડપી પૃથ્થકરણ જરૂરી હોય, તો 10 મીમી અથવા 15 મીમીની ટૂંકી કોલમ ઘણીવાર પસંદ કરવામાં આવે છે. ઉદાહરણ તરીકે, જ્યારે લેખકે પાઇપરાક્વિન ફોસ્ફેટ API માં જીનોટોક્સિક અશુદ્ધિ શોધવા માટે LC-MS/MS નો ઉપયોગ કર્યો, ત્યારે 3 μm*2.1 mm*100 mm કૉલમનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. અશુદ્ધિ અને મુખ્ય ઘટક વચ્ચેનું વિભાજન 2.0 હતું, અને નમૂનાની તપાસ 5 મિનિટમાં પૂર્ણ કરી શકાય છે. 3.2 રિવર્સ્ડ-ફેઝ ફિનાઇલ કૉલમ

ફિનાઇલ કૉલમ પણ એક પ્રકારનો રિવર્સ્ડ-ફેઝ કૉલમ છે. આ પ્રકારના સ્તંભમાં સુગંધિત સંયોજનો માટે મજબૂત પસંદગી છે. જો સામાન્ય C18 કૉલમ દ્વારા માપવામાં આવતા સુગંધિત સંયોજનોનો પ્રતિભાવ નબળો હોય, તો તમે ફિનાઈલ કૉલમ બદલવાનું વિચારી શકો છો. ઉદાહરણ તરીકે, જ્યારે હું celecoxib API બનાવી રહ્યો હતો, ત્યારે તે જ ઉત્પાદકના ફિનાઇલ કૉલમ અને સમાન સ્પષ્ટીકરણ (તમામ 5 μm*4.6 mm*250 mm) દ્વારા માપવામાં આવેલ મુખ્ય ઘટક પ્રતિભાવ C18 કૉલમ કરતાં લગભગ 7 ગણો હતો. 3.3 સામાન્ય-તબક્કો કૉલમ

રિવર્સ્ડ-ફેઝ કૉલમના અસરકારક પૂરક તરીકે, સામાન્ય-તબક્કા કૉલમ અત્યંત ધ્રુવીય સંયોજનો માટે યોગ્ય છે. જો ઉલટા-તબક્કાના સ્તંભમાં 90% થી વધુ જલીય તબક્કા સાથે એલ્યુટ કરતી વખતે ટોચ હજુ પણ ખૂબ જ ઝડપી હોય અને દ્રાવક શિખરની નજીક અને ઓવરલેપ પણ હોય, તો તમે સામાન્ય-તબક્કાના કૉલમને બદલવાનું વિચારી શકો છો. આ પ્રકારના કૉલમમાં હિલિક કૉલમ, એમિનો કૉલમ, સાયનો કૉલમ વગેરેનો સમાવેશ થાય છે.

3.3.1 હિલિક કૉલમ હિલિક કૉલમ સામાન્ય રીતે ધ્રુવીય પદાર્થોના પ્રતિભાવને વધારવા માટે બોન્ડેડ આલ્કિલ સાંકળમાં હાઇડ્રોફિલિક જૂથોને એમ્બેડ કરે છે. આ પ્રકારની સ્તંભ ખાંડના પદાર્થોના વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે. ઝાયલોઝ અને તેના ડેરિવેટિવ્ઝની સામગ્રી અને સંબંધિત પદાર્થો કરતી વખતે લેખકે આ પ્રકારની કૉલમનો ઉપયોગ કર્યો હતો. ઝાયલોઝ ડેરિવેટિવના આઇસોમર્સને પણ સારી રીતે અલગ કરી શકાય છે;

3.3.2 એમિનો કૉલમ અને સાયનો કૉલમ એમિનો કૉલમ અને સાયનો કૉલમ અનુક્રમે બોન્ડેડ આલ્કાઈલ સાંકળના અંતે એમિનો અને સાયનો ફેરફારોની રજૂઆતનો સંદર્ભ આપે છે, ખાસ પદાર્થોની પસંદગીમાં સુધારો કરવા માટે: ઉદાહરણ તરીકે, એમિનો કૉલમ એક સારી પસંદગી છે. શર્કરા, એમિનો એસિડ, બેઝ અને એમાઈડ્સના વિભાજન માટે; સંયુક્ત બોન્ડની હાજરીને કારણે હાઇડ્રોજનયુક્ત અને બિનહાઇડ્રોજનયુક્ત માળખાકીય સમાન પદાર્થોને અલગ કરતી વખતે સાયનો સ્તંભમાં વધુ સારી પસંદગી હોય છે. એમિનો કૉલમ અને સાયનો કૉલમ ઘણીવાર સામાન્ય તબક્કા કૉલમ અને રિવર્સ તબક્કા કૉલમ વચ્ચે સ્વિચ કરી શકાય છે, પરંતુ વારંવાર સ્વિચ કરવાની ભલામણ કરવામાં આવતી નથી. 3.4 ચિરલ કૉલમ

ચિરલ કૉલમ, જેમ કે નામ સૂચવે છે, ચિરલ સંયોજનોના વિભાજન અને વિશ્લેષણ માટે, ખાસ કરીને ફાર્માસ્યુટિકલ્સના ક્ષેત્રમાં યોગ્ય છે. જ્યારે પરંપરાગત વિપરીત તબક્કા અને સામાન્ય તબક્કાના સ્તંભો આઇસોમર્સના વિભાજનને પ્રાપ્ત કરી શકતા નથી ત્યારે આ પ્રકારના સ્તંભને ધ્યાનમાં લઈ શકાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, લેખકે 1,2-ડિફેનીલેથિલેનેડિયામાઇનના બે આઇસોમર્સને અલગ કરવા માટે 5 μm*4.6 mm*250 mm ચિરલ કૉલમનો ઉપયોગ કર્યો: (1S, 2S)-1, 2-ડિફેનીલેથિલેનેડિયામાઇન અને (1R, 2R)-1, 2 -ડિફેનીલેથિલેનેડિયામાઇન, અને બંને વચ્ચેનું વિભાજન લગભગ 2.0 સુધી પહોંચ્યું. જો કે, ચિરલ કૉલમ અન્ય પ્રકારના કૉલમ કરતાં વધુ ખર્ચાળ હોય છે, સામાન્ય રીતે 1W+/piece. જો આવી કૉલમની જરૂર હોય, તો એકમને પૂરતું બજેટ બનાવવું જરૂરી છે. 3.5 આયન વિનિમય કૉલમ

આયન વિનિમય સ્તંભો ચાર્જ થયેલ આયનોના વિભાજન અને વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે, જેમ કે આયનો, પ્રોટીન, ન્યુક્લિક એસિડ અને કેટલાક ખાંડના પદાર્થો. ફિલર પ્રકાર અનુસાર, તેઓ કેશન વિનિમય કૉલમ, આયન વિનિમય કૉલમ અને મજબૂત કેશન વિનિમય કૉલમમાં વહેંચાયેલા છે.

કેશન વિનિમય સ્તંભોમાં કેલ્શિયમ-આધારિત અને હાઇડ્રોજન-આધારિત સ્તંભોનો સમાવેશ થાય છે, જે મુખ્યત્વે એમિનો એસિડ જેવા કેશનિક પદાર્થોના વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે. ઉદાહરણ તરીકે, લેખકે ફ્લશિંગ સોલ્યુશનમાં કેલ્શિયમ ગ્લુકોનેટ અને કેલ્શિયમ એસીટેટનું વિશ્લેષણ કરતી વખતે કેલ્શિયમ આધારિત કૉલમનો ઉપયોગ કર્યો હતો. બંને પદાર્થોમાં λ=210nm પર મજબૂત પ્રતિભાવો હતા, અને વિભાજનની ડિગ્રી 3.0 સુધી પહોંચી હતી; ગ્લુકોઝ-સંબંધિત પદાર્થોનું વિશ્લેષણ કરતી વખતે લેખકે હાઇડ્રોજન-આધારિત કૉલમનો ઉપયોગ કર્યો હતો. કેટલાક મુખ્ય સંબંધિત પદાર્થો - માલ્ટોઝ, માલ્ટોટ્રિઓઝ અને ફ્રુક્ટોઝ - ડિફરન્સિયલ ડિટેક્ટર હેઠળ ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા ધરાવે છે, જેની તપાસ મર્યાદા 0.5 પીપીએમ જેટલી ઓછી છે અને 2.0-2.5 ની અલગતા ડિગ્રી છે.

આયન વિનિમય સ્તંભો મુખ્યત્વે કાર્બનિક એસિડ અને હેલોજન આયનો જેવા એનિઓનિક પદાર્થોના વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે; મજબૂત કેશન વિનિમય સ્તંભોમાં ઉચ્ચ આયન વિનિમય ક્ષમતા અને પસંદગીક્ષમતા હોય છે, અને જટિલ નમૂનાઓના વિભાજન અને વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય છે.

ઉપરોક્ત લેખકના પોતાના અનુભવ સાથે જોડાયેલી કેટલીક સામાન્ય લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કૉલમના પ્રકારો અને એપ્લિકેશન રેન્જનો માત્ર પરિચય છે. વાસ્તવિક એપ્લિકેશનમાં અન્ય ખાસ પ્રકારના ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ્સ છે, જેમ કે મોટા-છિદ્ર ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ, નાના-છિદ્ર ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ, એફિનિટી ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ, મલ્ટિમોડ ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમ, અલ્ટ્રા-હાઇ પર્ફોર્મન્સ લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફિક કોલમ (યુપીએલ ક્રોમેટોગ્રાફી) SFC), વગેરે. તેઓ વિવિધ ક્ષેત્રોમાં મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે. ક્રોમેટોગ્રાફિક કૉલમનો ચોક્કસ પ્રકાર નમૂનાની રચના અને ગુણધર્મો, અલગ કરવાની જરૂરિયાતો અને અન્ય હેતુઓ અનુસાર પસંદ કરવો જોઈએ.